实验步骤：

1、 培养细胞：消化细胞，PBS洗涤，1000g离心3min收集细胞，计数。每次提取需要5 ×10⁷个细胞，加入1.0 mL冰预冷的A液重悬细胞，4度震荡细胞悬液10分钟。

2、在700 x g和4°C下离心10分钟。将上清倒入新的冷冻管中，丢弃含有细胞核和完整细胞的颗粒。

3、再次在700 x g下在4°C下离心10分钟，然后将上清倒入新的冷冻管中。

4、在4°C下，10000 x g离心15分钟。丢弃上清，在沉淀里面加1ml  A液+10ul B液。

5、在4°C下，10000 x g离心15分钟，丢弃上清，将最终颗粒重新悬浮在尽可能小体积(约0.1 ml)的萃取缓冲液或特定的实验缓冲液中。颗粒即为线粒体。

注意事项：

1. 尽量减少反复冻融的次数，可以根据使用的量适当分装。

2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品在文章中的写法：

英文： Dowobio （Shanghai，China）

中文： 上海多沃生物科技有限公司  Dowobio，上海