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产品介绍：
该试剂采用纳米技术合成。转染试剂通过物理作用将病毒富集在细胞表面以增强感染效率。由于纳米技术的应用，转染试剂在大幅度提高慢病毒感染效率的同时，细胞毒性非常小，并且不干扰细胞生理功能。
保存说明：
本品常温运输，储存于 4℃，有效期 12 个月。
实验过程：
1. 提前一天细胞铺板
提前一天种植细胞，以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整，不要采用过高的细胞密度)。
感染实验
1．将转染试剂用无血清或者1-2%血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成增强剂稀释液。
2．将病毒浓缩液用无血清或者1-2%血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成病毒稀释液。
注：由于病毒浓度情况不同，具体病毒浓缩液用量酌情依据常规用量，建议进行和增强剂配合的梯度实验。
3．将增强剂稀释液和病毒稀释液充分混合，4℃静置15分钟。
4．上述混合液加入到含完全培养基的细胞上，37℃培养8小时后观察细胞状态，如没有明显变化，不要更换培养基，继续培养24小时后常规更换培养基。由于慢病毒感染较慢，一般在感染96小时后观察结果。
表1不同细胞培养容器推荐用量
细胞培养容器 | 表面积(cm2) | 表面积相对24-well比率 | 每孔用量 | 每孔稀释液用量 | 每孔培养基总量 |
96-well | 0.3 | 0.2 | 0.5-1.5μl | 10μl | 100μl |
48-well | 0.7 | 0.4 | 1-3μl | 15μl | 200μl |
24-well | 1.9 | 1 | 2.5-7.5μl | 25μl | 500μl |
12-well | 3.8 | 2 | 5-15μl | 25μl | 1ml |
6-well/35-mm | 10 | 5 | 10-30μl | 50μl | 2ml |
60mm/T25flask | 21 | 10 | 25-75μl | 125μl | 5ml |
100mm/T75flask | 58 | 30 | 75-225μl | 250μl | 15ml |
*可根据毒性，效率等因素单独增减
*此处用量仅做说明，具体用量可酌情依据常规用量
注意事项：
1．采用转染试剂增强后，感染时的细胞融合度对感染效果有影响，建议细胞融合度在50%左右时进行感染实验(悬浮细胞根据需要调整，不要采用过高的细胞密度)。
2．在使用转染试剂增强剂之前，应先测定感染细胞最佳的MOI值(Multiplicity of Infection，感染复数)是指每个细胞平均感染的病毒数，通常MOI越高，病毒整合到染色体的数量以及目的蛋白的表达量越高。对于分裂活跃的细胞，比如Hela、293细胞，MOI=1～3时，80%以上的细胞均表达目的基因。而对于非分裂细胞，如原代细胞，感染效率较低，需要进行MOI梯度实验，测定感染细胞最佳的MOI值。在最佳的MOI值基础上应用增强剂效果更好。
3．转染试剂和病毒的稀释液采用和细胞基础培养基一致的无血清或者1-2%血清液体，如无血清或者1-2%血清DMEM或1640。
4．转染试剂和感染效率的关系，在其他条件固定的情况下，增强剂用量在推荐用量的1-3倍范围内，用量越大，感染效率越高。
5．本品使用安全，未发现任何生物、化学毒性。如不慎沾染，用清水冲洗即可。
6．本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
7．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
常见问题及解决方案：
问题 | 可能原因 | 解决方案 |
使用增强剂后效果不明显 | 病毒浓度低 | 加大病毒用量 |
细胞密度大 | 减少细胞密度 | |
增强不明显 | 增大增强及用量1-3倍 |
本产品在文章中的写法：
英文： Dowobio （Shanghai，China）
中文： 上海多沃生物科技有限公司 Dowobio，上海
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